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爱尔兰淀粉总量检测试剂盒 型号:ZS211-K-TSTA-100A库号:M62545
  • 产品名称:爱尔兰淀粉总量检测试剂盒 型号:ZS211-K-TSTA-100A库号:M62545
  • 产品型号:ZS211-K-TSTA-100A
  • 所属类别:实验室设备
  • 发布时间:2026-09-03
  • 已获点击:6
详细说明
淀粉总量检测试剂盒
(α-淀粉酶 /淀粉葡萄糖苷酶)
说明书
K-TSTA-100A
02/22
100 个测试/盒
AOAC Method 996.11
AACC Method 76-13.01
(and improvements)
引言
淀粉大致包含两种成分,直链淀粉主要是通过α-1,4-糖苷键连接的 D-葡聚糖,
含有少的 α-1,6 支链;而支链淀粉中葡萄糖分子之间除了以 α-1,4-糖苷键相连外,还有以 α-1,6-糖苷键相连的分支结构。淀粉的酶解法主要是将淀粉置于高温下,通过耐热α-淀粉酶进行糊化,以产生一系列直链和支链糊精,随后用淀粉葡
糖苷酶(AMG)定量水解为葡萄糖。在 ATP 和 NADP+ 存在下,使用葡萄糖氧化酶/过氧化物酶 (GOPOD) 试剂或己糖激酶/磷酸葡萄糖脱氢酶检测释放的葡萄糖。在一系列成功研究的基础上,该方法被采用为 AOAC 方法 996.11、AACC
方法 76-13.01 和 ICC 方法 168。
本试剂盒在 AOAC 方法 996.11 的基础上进行了适当的优化,从而提供了一个
加方便用户的淀粉检测方法,即K速总淀粉检测法(RTS)(图 1)[程序(a)]。
图 1 快速总淀粉检测法(RTS) [程序(a)]
本试剂盒可用来检测各种食品、饲料、植物和谷物产品(中的总淀粉含量。对于大多数样品(例如小麦粉),在耐热 α-淀粉酶存在的情况下,淀粉
能在约 100 ℃的孵育过程中溶解。含有高水平抗性淀粉(例如高直链玉米淀粉)的样品则需要在 1.7 M 的冷 NaOH 或热的 DMSO 中预溶解。对于含有可
溶性淀粉或麦芽糊精的样品,不需要用耐热α-淀粉酶进行孵育。
反应原理
耐热 α-淀粉酶将淀粉水解成可溶性的带支链/不带支链的麦芽糖糊精 (1)。
必要时,可通过用冷的 1.7 M NaOH 搅拌来预溶解样品中的抗性淀粉,然后用乙酸钠缓冲液中和,用 α-淀粉酶水解(2)。另外,在 100°C 的 DMSO 中进行溶解也是的方法。
淀粉葡萄糖苷酶 (AMG) 可将麦芽糊精定量水解为 D-葡萄糖 (3)。
D -葡萄糖氧化为 D -葡萄糖酸,释放等摩尔量的过氧化氢(H2O2),该反应在含过氧化物酶和醌亚胺染料的比色反应中可定量检测(4, 5)。
单个样品的分析可以在 70 分钟内完成,20 个样品可以在 2 小时内完成。
特异性、灵敏度、线性和度
该试剂盒对 α-葡聚糖(包括淀粉、糖原、植物糖原和非抗性麦芽糊精)具有特异
性。该试剂盒的吸光度差异为 0.010 单位。 根据推荐的总淀粉 (RTS) 方法,使用 100 mg 的样品重量和 10.2 mL 的提取体积,这相当于约 0.09 g/100 g 的总淀粉含量。检出限为 0.18 g/100 g 总淀粉,即样质量为 100 mg,提取体积为10.2 mL 时,吸光度差异为 0.020。该方法在每次检测 4-100 μg D -葡萄糖范围内时呈线性关系。
干扰
如果 D-葡萄糖的转化在测试规定的时间内(约 20 分钟)完成,一般可以认为没有发生干扰。
试剂盒
Megazyme 提供对总淀粉含量进行 50/100 次检测的试剂盒。该试剂盒包含的检测方法以及:
瓶 1:耐热 α-淀粉酶(Megazyme 货号:E-BSTAA。pH 6.5,40°C,3,000 U/mL;
pH 5.0,40°C,3,000 U/mL),在 4°C 下可稳定储存 4 年以上,在-10°C 下可稳定
保存 10 年以上。
K-TSTA-50A: 5 mL
K-TSTA-100A: 10 mL
瓶 2:淀粉葡萄糖苷酶(Megazyme 货号:E-AMGDF。pH 4.5,40°C 时,底物为
可溶性淀粉,酶活为3300 U/mL;底物为对硝基苯-β-麦芽糖苷,酶活为200 U/mL),
在 4°C 下可稳定储存 4 年以上,在-10°C 下可稳定保存 10 年以上。
K-TSTA-50A: 5 mL
K-TSTA-100A: 10 mL
瓶 3:GOPOD 试剂缓冲液。缓冲液(50 mL,pH 7.4),含对羟基苯甲酸和叠氮化
钠(0.09% w/v)。在 4°C 下可稳定储存 4 年以上。
瓶 4:GOPOD 试剂酶。含葡萄糖氧化酶、过氧化物酶和 4-氨基安替比林。冻干
粉。在-10°C 下可稳定保存 4 年以上。
瓶 5:D-葡萄糖标准溶液(5 mL,1.0 mg/mL),溶剂为 0.2% (w/v) 苯甲酸。室温
保存,可稳定保存 5 年以上。
瓶 6:标准化常规玉米淀粉质控样。小瓶标签上显示的是淀粉含量。室温保存,
可稳定保存 5 年以上。
A. 试剂/悬液的制备:
1. 使用提供的瓶 1 中的内容物。该溶液是粘性的,因此应该用容积式分配器进
行操作,例如 搭配 5.0 mL 吸头 BRAND PD-Tip®使用的 BRAND HandyStep® S
(用于移取 0.1 mL 的试样)。
在 4°C 下可稳定储存 4 年以上。
在-10°C 下可稳定保存 10 年以上。
注:如果使用者参考 AOAC 方法 996.11(方法 c),请用含 5 mM 氯化钙的
MOPS 缓冲液(50 mM,pH 7.0)[B(e)]将瓶 1 的内容物稀释 30 倍后再使用。
2. 使用提供的瓶 2 中的内容物。该溶液是粘性的,因此应该用容积式分配器进
行操作,例如 搭配 5.0 mL 吸头 BRAND PD-Tip®使用的 BRAND HandyStep® S
(用于移取 0.1 mL 的试样)。
在 4°C 下可稳定储存 4 年以上。
在-10°C 下可稳定保存 10 年以上。
3. 将瓶 3(GOPOD 试剂缓冲液)用去离子水定容至 1L,配制完成后立即使用。

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